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　　本期文章引用格式：白求恩精神研究会检验医学分会, 中华医学会检验医学分会血液体液学组, 中国医学装备协会检验医学分会基础检验设备学组. 人工智能辅助外周血细胞形态学检查的中国专家共识[J]. 中华检验医学杂志, 2023, 46(3): 243-258.

　　血细胞形态学检查在引起白细胞、红细胞、血小板变化的相关临床疾病诊疗过程中起着非常重要的作用，也是目前临床实验室血细胞分析的重要复检手段。传统的人工显微镜下血细胞形态学检查被认为是标准方法，但存在的方法学不足明显限制了其广泛开展和深入应用，在此背景下，自动数字化、智能化的血细胞形态学分析仪/系统便不断被研发和准入，并应用到临床诊疗等过程中。

　　尽管人工智能辅助的血细胞形态学检查方法具有广阔的临床应用场景和前景，国内已有450余台设备应用于临床检验，但该技术方法还存在诸多不完善的方面，临床实验室应当全面、准确认识其分析性能，在临床应用时更需要制定科学、规范、有效的检验流程和操作程序。

　　推片机一般根据血液标本的血细胞比容或黏度来调整滴加的血量（2~4μL）、推片角度（20.0°~36.0°）、速度（30~185mm/s）、血滴延展时间（0.5~3.0s）等参数。推片机制备的血涂片比手工法稳定性更高，与血细胞形态分析仪的适配度更好。

　　推片机和手工制备的血涂片均可用于仪器法血细胞形态分析，但由于细胞颜色和体积差异（推片机制备的细胞可能更大、更薄），血细胞形态分析仪对手工与推片机制备的血涂片中的细胞识别结果可能存在差异。

　　共识1：无论是推片机还是手工制片，均应对其制备的血涂片质量进行评价，以满足人工智能血细胞形态学检查和人工镜检的质量要求。目前临床上常用的推片机制片时会根据血液血细胞比容和黏度调节用血量，一般2~4μl；制备的血膜面积约为5cm2。考虑白细胞少、异常细胞比例低等血液标本，以及需保存全视野图像等情况，应适当增加用血量和血涂膜面积及厚度。

　　共识2：推片机制备的血涂片比手工法稳定性更高，可较好地消减手工制备血涂片重复性差及细胞破碎问题，提高血细胞形态学检查的准确性，高制片效率，与血细胞形态分析仪的适配度更好；使用手工法制备血涂片时，需对标实验室所使用的仪器/系统的细胞识别和分类性能制定适宜的手工制备血涂片标准操作程序。无论是推片机还是手工制备血涂片均应做好质量评估和控制。

　　自动染片机染色主要采用滴染或浸染的方式对血涂片进行染色 浸染法和滴染法相比，染液用量较少，缺点是试剂长时间暴露在空气中容易出现变性，染液重复使用会导致染色质量下降。

　　自动染片机染色过程一般包括：甲醇预固定，染色液原液初染（固定），染色液与一定比例的缓冲液混合后复染（染色），冲洗，干燥等几个步骤。为得到最佳染色效果，自动染片机对每一个染色环节可设置多种时间和模式，临床实验室应通过实验确定最佳的染色方案。

　　由于实验室的染色方法设置不完全相同，为保证自动化血细胞形态分析仪能准确识别细胞及形态学改变，必须对血涂片染色质量进行评价。仪器染色法应与手工染色法进行镜检结果一致性比对，符合率应大于95%。

　　共识3：血细胞形态学检查时血涂片染色常用瑞氏染液、 ‑姬姆萨复合染液；检查细胞内寄生虫或其他病原体时可采用姬姆萨染液；自动化血细胞形态分析仪生产商供应的或其他市售及自配的染色液均可满足保证细胞识别和分类准确性的要求。

　　共识4：对于人工智能血细胞形态学检查，自动染片机染色效果较手工染色更稳定。使用自动染片机染色时，应通过实验评估确定适合的实验室染色方法和条件，在调整过程中尽量不要改变多个设置，否则不易发现影响染色效果的因素。

　　共识5：细胞形态的准确识别依赖于染色良好的血涂片，无论手工方法还是自动染片机染色，都应建立评估染色效果的程序性文件并规范执行。评估内容至少应包括染色质量、细胞分类的准确精密度、异常细胞检出率。

　　共识6：人工智能血细胞形态学检查对血涂片染色质量的基本要求：细胞形态完整，各成分着色正常、分色清晰，核染色质结构清楚。红细胞呈粉红色或琥珀色，未成熟红细胞各阶段易于识别；粒细胞三种颗粒易于识别，未成熟粒细胞各阶段易于识别；原始细胞、反应性淋巴细胞、异常淋巴细胞易于识别；白细胞、红细胞和血小板异常形态易于识别。仪器染色应与手工染色进行镜检结果一致性比对，符合率应大于95%。

　　：利用自动阅片机对血涂片自动浏览，按照设定好的白细胞数量（通常为100~200个有核细胞/每份标本）抓取细胞图像到计算机中并进行预分类，再经人工审核和确认，大大减轻了人工镜检工作量，缓解了人工镜检负担；

　　：在怀疑有可能存在有重要临床诊疗价值的异常细胞等情况下，通过阅片机进一步增加分类计数的细胞（可增至500个有核细胞/每份标本），有助于更好地发现外周血中比例较低的原始细胞和/或幼稚细胞、异常淋巴细胞、发育异常和髓外造血的细胞形态学改变等重要信息，提高阳性检出率；

　　：复检要求至少观察1000个红细胞，计数百分比，但人工镜检常难以达到，自动阅片机能在较短时间内拍摄1000个以上红细胞并对形态异常进行初步计数分析，能弥补人工镜检的细胞数量限制；

　　：通常显微镜复检涂片要求保留2周，利用自动阅片机分析后，图像资料可长期存储于计算机内，便于回顾、后期调阅和数据管理；

　　：借由计算机中间件将自动化血细胞形态学分析仪与血细胞分析流水线整合，形成血细胞分析整体化流水线，实现从检测到复检的流程自动化，即从检测到复检规则判断、从血涂片制备到显微镜复检的全程自动化。

　　共识7：自动化血细胞形态分析仪用于血细胞分析的复检及血细胞形态学检查，能减轻人工镜检的工作负荷，提高血细胞形态学检查的工作效率；可以提高原始、幼稚细胞和形态异常细胞的检出率；有助于异常红细胞的定性定量分析；对血小板数量评估及血小板聚集引起的血小板假性减少的筛查也有一定价值。临床实验室应积极开展该项检验诊断技术。

　　共识8：临床实验室宜将自动化血细胞形态分析仪与血细胞分析仪整合使用；基于目前自动化血细胞形态分析仪的分析性能及规范化、标准化现状的考虑，应结合本室的血细胞复检规则及结果审核报告规则制定相应的阅片规则，制定仪器法细胞预分类和形态预表征结果的人工确认、再分类和必要时的人工镜检的操作程序。

　　共识9：利用现有的人工智能血细胞形态学检查的技术和网络平台，积极实现跨院区、跨科室及跨医院、跨区域的远程审核、会诊工作模式。但实施前应评审和论证网络安全、患者隐私及会诊专家资质情况。

　　目前自动化血细胞形态分析仪/系统可识别的细胞谱及细胞形态异常主要包括：1.白细胞分类及形态异常；2.红细胞形态学特征检查；3.血小板估算。

　　共识 10：使用自动化血细胞形态分析仪进行白细胞分类时，应清楚了解所使用的仪器/系统的细胞识别谱，必须清楚了解仪器细胞识别的准确度，必要时进行性能验证。对于预分类细胞符合率和检出率低于 95% 的细胞应进行再分类，再分类时应依据预分类细胞符合率和检出率数据，对不同类型细胞予以不同程度的关注和处理，应特别关注预分类准确度低、临床诊疗价值大的细胞。

　　共识11：使用自动化血细胞形态分析仪进行白细胞分类时，应清楚了解仪器细胞分类的准确度，必要时进行性能验证。对于再分类准确度的相关系数低于0.95的细胞，应在结果审核时考虑进行人工分类计数，特别是诊断价值较大的一些细胞类型。

　　共识12：目前对自动化血细胞形态分析仪检测红细胞形态以及血小板数量、分布、形态的性能评估要求尚缺乏足够的文献支持，因此对仪器法检测的形态学异常阳性提示均应进行人工镜检。

　　异常细胞检测阳性的判定：当外周血中检出以下比例的异常细胞时视为阳性。原始细胞（包括幼稚单核细胞、幼稚淋巴细胞）≥1%；异常早幼粒细胞≥1%，早幼粒细胞≥1% 中幼粒细胞≥1%，晚幼粒细胞≥2%；有核红细胞≥1% 反应性淋巴细胞5%。

　　共识13：使用自动化血细胞形态分析仪进行白细胞形态学检查时，必须清楚了解仪器对异常细胞的筛查能力，必要时进行性能验证。检测临床标本时，对于筛查准确度低于90%、同时敏感度低于95%的异常细胞，在人工确认时需高度关注，应紧密结合血细胞分析仪细胞数量、直方图/散点图和报警信息进行分析审核。

　　共识14：（1）批内精密度：取2份标本（正常+异常）的血涂片，每片分类不少于10次，每次至少分类计数100个白细胞，计算标准差和变异系数。（2） 批间精密度：应至少取2份标本（正常+异常）的血涂片，每份标本的血涂片重复检测3~5次，连续检测5d，每张涂片每次分类计数不少于100个，算标准差和变异系数。

　　共识15：精密度评估指标要求：按99%可信区间要求，以中华人民共和国卫生行业标准WST246‑2005《白细胞分类计数参考方法》为比对结果判定标准，低标准差和变异系数表明具有良好的重复性。

　　数字细胞图像质量受到多种因素，包括显微镜物镜视场大小、光学分辨率（数值孔径）和显微照相机的像元尺寸等的影响，不同的血细胞形态数字图像分析系统配置不尽相同，但所采集（拍摄）的细胞图像应清晰显示光学显微镜油镜下细胞的形态、结构：至少包括核染色质结构、核仁形态，胞质中不同类型的颗粒（例如嗜天青颗粒、嗜酸性和嗜碱性颗粒）、空泡、异常包涵体（如Auer小体）等。

　　共识16：自动化血细胞形态数字图像分析系统至少可有效放大细胞100和1000倍。放大1000倍细胞图像要求能清晰呈现细胞的细微形态结构，可接近或达到传统光学显微镜下细胞的形态特征。建议数字图像分析系统配置适合血细胞形态100~1000倍彩图（拍摄）的数码相机，而且采图

　　准确度：采用已手工分类明确的外周血涂片20张（来自不同个体的样本），包含正常血涂片12张与计数异常血涂片8张，每张血涂片进行两次阅片检测的预分类结果，取均值后，与手工检测结果比较，按99%可信区间要求进行判断，80%以上标本符合要求。

　　精密度：采用正常和异常血涂片各1张，重复检测10次，取各项目变异系数。按99%可信区间要求或厂家标明范围进行判断。各厂家宜提供质控片，监测日常仪器状态，维持结果的稳定性。

　　结果比对：多台仪器之间应进行比对，每次比对至少选取5张血涂片（2张正常、3张异常），采用人工确认结果进行比较，按99%可信区间要求进行判断，80%以上标本符合要求。

　　室间质评：由组织方对实验室按使用仪器的厂家和型号进行分组，血涂片制备应采取相应配套系统。采用人工确认结果进行比较，按 99%间要求进行判断。

　　共识 17：应按实验室质量管理要求对人工智能血细胞形态学检查的白细胞项目实施质量控制，包括准确度、精密度评价和结果比对。红细胞与血小板的形态学检查项目目前尚不具备比对的工作基础。

　　共识18：自动化血细胞形态分析仪/系统阅片方式和数据采集要求包括：（1）应在阅片范围设置上保证具备自动定位血涂膜体尾交界区功能。（2）不强调物理拍摄图片信息的方式，更关注应能保障还原人工显微镜镜检的图片保线）应设有相应的拍摄（采集）细胞图像数量设置的控制程序，白细胞采集数量为100~500个，甚至更多；红细胞采集数量为1000~2000个（或包含1000~2 000个红细胞的视野个数），甚至更多。（4）应具备拍摄、识别血小板聚集图像的功。